Charakterisierung des Hämocyanins von "Haliotis rubra" (ePub)

Bachelorarbeit aus dem Jahr 2006 im Fachbereich Biologie - Zoologie, Note: 1,0, Johannes Gutenberg-Universität Mainz (Zoologie), Sprache: Deutsch, Abstract: Hämocyanin ist das respiratorische Protein vieler Arthropoden und Mollusken. Obwohl die Arthropoden- und Mollusken-Hämocyanine den gleichen Namen tragen, und es sich bei beiden um extrazelluläre Kupferproteine handelt, sind sie nicht nah miteinander verwandt. Vielmehr weisen die Arthropoden- und Mollusken-Hämocyanine grundlegende Unterschiede in der Primär-, Tertiär- und Quartärstruktur auf und werden unterschiedlichen Protein-Superfamilien zugeordnet. Das Hämocyanin der Mollusken hat die Form eines Hohlzylinders und besteht aus einer oder mehreren dekameren Grundeinheiten.
In der vorliegenden Arbeit wurde das Hämocyanin der marinen Schnecke Haliotis rubra aus der Ordnung Archeogastropoda und der Familie Haliotidae untersucht. Hierzu wurden die zwei Isoformen des Hämocyanins mittels Ionenaustausch-Chromatographie aufgetrennt und durch native-PAGE, SDS-PAGE und 2-dimensionale SDS-PAGE bezüglich ihrer biochemischen Eigenschaften charakterisiert. Weiterhin wurden die verschiedenen Aggregationszustände der beiden Isoformen elektronenmikroskopisch untersucht. Um die Domänenstruktur zu entschlüsseln wurde das Hämocyanin partiell proteolytisch verdaut und die erhaltenen Fragmente über Ionenaustausch-Chromatographie und Gelfiltration aufgetrennt. Die Identifizierung der Domänenstruktur erfolgte schliesslich über 2-dimensionale crossed-line Immunelektrophorese. Hierdurch konnte die Domänenstruktur entschlüsselt werden.